Protective effects of recombinant Brucella abortus Omp28 against infection with a virulent strain of Brucella abortus 544 in mice

The outer membrane proteins (OMPs) of Brucella (B.) abortus have been extensively studied, but their immunogenicity and protective ability against B. abortus infection are still unclear. In the present study, B. abortus Omp28, a group 3 antigen, was amplified by PCR and cloned into a maltose fusion protein expression system. Recombinant Omp28 (rOmp28) was expressed in Escherichia coli and was then purified. Immunogenicity of rOmp28 was confirmed by Western blot analysis with Brucella-positive mouse serum. Furthermore, humoral- or cell-mediated immune responses measured by the production of IgG1 or IgG2a in rOmp28-immunized mice and the ability of rOmp28 immunization to protect against B. abortus infection were evaluated in a mouse model. In the immunogenicity analysis, the mean titers of IgG1 and IgG2a produced by rOmp28-immunized mice were 20-fold higher than those of PBS-treated mice throughout the entire experimental period. Furthermore, spleen proliferation and bacterial burden in the spleen of rOmp28-immunized mice were approximately 1.5-fold lower than those of PBS-treated mice when challenged with virulent B. abortus. These findings suggest that rOmp28 from B. abortus is a good candidate for manufacturing an effective subunit vaccine against B. abortus infection in animals.

Effect of ciprofloxacin on specific immune response in rabbits.

Ciprofloxacin (10 mg/kg body weight, iv, twice daily for 4 days) failed to alter specific antibody titres, total immunoglobulin concentration, total serum protein concentration, total leukocyte count, lymphocyte percentage, phagocytic index and skin thickness in DNCB skin sensitivity test against Brucella plain killed antigen in New Zealand White rabbits. It can be concluded that ciprofloxacin at the dose and duration employed did not adversely affect specific immune response in normal rabbits.

Uso de las pruebas de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas y aglutinación con rivanol para el diagnóstico de brucelosis bovina en Yucatán, México / Use of an enzyme-linked immunosorbent assay and the rivanol agglutination test for the diagnosis of bovine brucellosis in Yucatan, Mexico

Se usaron sueros negativos de animales vacunados (322) y no vacunados (248) provenientes de hatos libres de brucelosis y sueros positivos (90) a las pruebas de Rosa de Bengala (RB) y fijación de complemento (FC) de hatos infectados con Brucella abortus, para determinar la sensibilidad relativa y la especificidad de las pruebas inmunoenzimática indirecta (I-ELISA) y de aglutinación con rivanol (RIV). La concordancia entre pruebas se determinó mediante el análisis kappa usando 688 sueros. La prueba I-ELISA mostró una sensibilidad del 100 por ciento y especificidad de 92.8 por ciento. La RIV tuvo una sensibilidad de 97.8 por ciento y especificidad de 100 por ciento. La concordancia (Kappa) entre I-ELISA y FC fue de 0.73, entre I-ELISA y RIV de 0.74, entre I-ELISA y RB de 0.79 y entre RIV y FC fue de 0.96. Los valores predictivos (VP); para I-ELISA fueron 66.9 por ciento para positivos y 100 por ciento para negativos y para RIV, 100 por ciento para positivos y 99.7 por ciento para los negativos. La prueba I-ELISA puede ser usada como tamiz en las condiciones de Yucatán o como prueba confirmatoria en lugares donde la vacunación no se lleva a cabo. La prueba de RIV mostró una falta de sensibilidad, por tanto no se recomienda en etapas finales de programas de erradicación, pero podría usarse como prueba confirmatoria en programas de control o etapas tempranas en campañas de erradicación

Immunological assay after vaccination of goats with brucella melitensis rev.I and brucella abortus 45/20 vaccines at Saudi Arabia

The living smooth Brucella melitensis Rev. I vaccine given in the normal dose [7x10[8] organism] to goats 3 to 5 months of age stimulated a marked increase in agglutinin titer. Fractionation of pools of serum by gel filtration by anion exchange chromatography, using diethylaminoethyl [DEAE] cellulose showed that both IgM and IgG agglutinins were present from 12 to 47 days after goats were vaccinated. Only mercaptoethanol [ME]- sensitive agglutinins were detected in most goats 4 months after vaccination, but 2 of 30 goats retained ME- resistant agglutinins for the 13 1/2 - month observation period. Fractionation of serums from goats representative of these 2 types of serologic response indicated that most goats had only IgM agglutinins whereas the 2 given goats had activity in the IgG fraction. Adult goats given Brucella abortus 42/20 adjuvant vaccine and revaccinated 5 months later developed low agglutination titers to smooth antigen, and all became test Positive to the antiglobulin test. Fractionation of serum of pools taken 1 week and 8 months after revaccination indicated that antibody activity was restricted to the IgG fraction. Sera from 5 vaccinated and nonvaccinated goats which were Positive by bacteriological culture examination at necropsy 31 to 47 days after goats were given conjunctival inoculation of virulent B. melitensis had antibody activity in both IgG and IgM fractions Test Positive reaction to the ME, complement-fixation [CF], and antiglobulin [AG] test were restricted to the IgG-containing fractions of serum whereas reactions to the agglutination [STT] and the card tests appeared with either or both fractions. The effect of these findings on the choice of tests for the differentiation of vaccination response is discussed

Vacunas en la brucelosis humana / Vaccines in human brucellosis

Hace casi 100 años la brucelosis humana fue considerada por Zammit y Horrocks como una zoonosis, sólo 18 años después que Bruce identificó el agente etiológico de la fiebre de Malta. A lo largo de los años, el avance científico se ha visto encaminado primordialmente al control de la brucelosis animal en los aspectos de diagnóstico y vacunación. En cuanto a la enfermedad en el humano, el progreso más importante ha sido la quimioterapia, aunque en la última década el diagnóstico correcto ha sido un asunto de preocupación general. Las estrategias de erradicación de la brucelosis se divide en tres categorías: 1) Erradicación de la brucelosis animal; 2) Mejoramiento de las medidas de higiene individual y saneamiento y 3) Inmunización. Las vacunas contra la brucelosis han sido desarrolladas a lo largo de tres líneas: 1) vacunas vivas preparadas con cepas atenuadas como B. abortus cepa 19 y B. melitensis cepa Rev.1; 2) células completas inactivadas, como B. abortus cepa 45/20 y B. melitensis H-38 que se administran con adyuvante oleoso y 3) vacunas preparadas con fracciones celulares. Todas ellas han sido usadas ampliamente en el control de la brucelosis en animales y sólo en algunos casos muy particulares en humanos

Vacuna fenol-insoluble contra la brucelosis humana: evaluacion del poder inmunogenico en cobayos / Phenol-insoluble vaccine against human brucellosis: evaluation of the immunogenic power in guinea pigs

Se examino una vacuna diseñada para inmunizar al hombre, preparada con extracto de fenol insoluble, para determinar si protegia a cobayos contra el desafio con la cepa virulenta B. abortus 2308. Se incluyeron en el experimento las vacunas vivas atenuadas B. abortus cepa 19 y B. melitensis Rev. 1, para comparar los resultados. Se vacunaron 93 animales en cada grupo, que fueron subdivididos en subgrupos de 31 y se los desafio con '10 POT. 4', '10 POT. 3' Y '10 POT. 2' unidades formadoras de colonias de la cepa B. abortus 2308 virulenta. El analisis global de los resultados demostro una proteccion del 11.9 por ciento en animales vacunados con el extracto de fenol insoluble, 65 por ciento en los vacunados con B. abortus cepa 19 y 95 por ciento en el grupo que recibio vacuna B. melitensis Rev. 1.